Calibration of Microscope for Nematode Morphometrics

(Prepared by Dr. Ignacio Cid del Prado, Colegio de Postgraduados, Mexico)

 Rev 03/29/2021  

CALIBRACIÓN DEL MICROSCOPIO

Para clasificar a un organismo, no solo basta con la observación de las características morfológicas, sino que es necesario hacer un estudio de la morfología interna y externa, para la cual deberá obtener las medidas de las estructuras morfológicas. La obtención de dichas medidas están determinadas por el coeficiente micrométrico, el cual se obtiene con la ayuda de la reglilla del ocular y la reglilla micrométrica o objetivo micrométrico, que está dividido en unidades que es el micrón, que tiene un valor de 0.001 mm.

El ocular micrométrico está compuesto de un disco de vidrio de 2 cm de diámetro (micrométrico ocular), el cual contiene una escala de 1 o 2 m, dividida en 20 partes y cada parte está dividida en 10 divisiones.

El objetivo micrométrico, es un portaobjetos, en cuyo centro se haya grabada la escala de 1 a 2 mm, dividida en 100 partes y cada división mide 10 micra.

El coeficiente micrométrico, es el factor equivalente a la micra de una división del ocular micrométrico.

OBTENCION DEL COEFICIENTE MICROMETRICO

Con cada objetivo del microscopio, se tiene que obtener el coeficiente micrométrico.

1.    Coloque sobre la platina el objetivo micrométrico, enfoque la escala

 

2.    Sustituya, uno de los oculares, por el ocular micrométrico, corrija el enfoque de ambas escalas, de tal forma que queden muy próximas entre si o bien sobrepuestas de tal forma que coincidan.

 

3.    A partir de cero de ambas escalas, cuente el número de divisiones que hay entre la primera y segunda escala, hasta que exactamente coincidan, entre mas distante estén las líneas de coincidencia del punto de partida más exactamente es la calibración.

 

4.    Observe que en la figura, en la primera coinciden el cero de la reglilla del ocular (15 unidades), con el cero de la reglilla del objetico (0.7 unidades) y que de nuevo coinciden por segunda vez el 57 del ocular con el 0.27 del objetivo. Cada división de la reglilla equivale a 10 micra, por lo que 0.27 mm equivale a 270 micra. ¿Cuánto equivale una unidad del ocular micrométrico? El coeficiente micrométrico es entonces, el valor que buscamos, el cual se obtiene de la siguiente manera:

 

 

 

 

5.    Coeficiente micrométrico

 

             Número de divisiones del objetivo micrométrico X 10

             Número de unidades del ocular micrométrico 

 

Ejemplo:

No. De divisiones del objetivo X 10= 270 micra

No. De unidades del ocular= 57

 

Por lo tanto:   270/57= El coeficiente micrométrico para el objetivo utilizado es de 4.73 µm

 

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